Complete Meida

Experiment/Basic & Protocol

Lavigne 2022. 3. 26. 23:58

아래 내용은 HaCat 세포 기준이며 세포마다 Media 성분 및 조성은 달라진다.

Complete Media (50ml) : FBS 5ml(10%), P/S 0.5ml(1%) , F-12배지 44.5ml

1. FBS, p/s 를 -70℃ 냉동실에서 꺼내 water bath 약 37℃ 에서 빠르게 해동시켜준다.

2. FBS를 conical tube에 10% (5ml) 채워준다

3. p/s를 1% (0.5ml) 채워준다.

4. conical tube의 50ml까지 DMEM/F-12 배지로 채워 마무리한다.

시약 정보

FBS : Fetal Bovine Serum 소 태아 혈청 (혈액 중 혈구와 섬유소원을 제거한 액체 성분)

1. 세포 성장과 기능에 관여하는 호르몬 제공

2. 세포의 부착과 확산인자 제공

3. 호르몬, 중금속, 지질의 운반 단백질 제공

4. 증식 환경에 있는 독성 성분에 부착 및 중화

5. 성분 :단백질, 펩타이드, 호르몬, 영양소와 대사물질, 각종 무기질, 억제인자

6. 종류: 우태혈청 FBS – 보편적으로 사용 / 우아혈청 BCS

p/s : Penicillin Streptomycin 항생제 / A/A : Antibiotics Antimycotics, fungi 오염 막는 용도

1. Penicillin - 세균의 세포벽 합성 억제, 농도가 낮아지면 세균이 자랄 수 있음 -> 2일에 한 번 정도 배지 교체하면 좋음

2. Streptomycin – 세균의 단백질 합성을 막아 세균을 죽임

DMEM / F-12 배지 :

DMEM/F-12, HEPES

Contains 15 mM HEPES buffer, and L-glutamine.